技術(shù)簡介
細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)是細(xì)胞功能組學(xué)研究的核心內(nèi)容。而受體配體結(jié)合啟動(dòng)細(xì)胞信號(hào)活動(dòng)是許多激活或抑制性信號(hào)通路關(guān)鍵的起始步驟。通過制備細(xì)胞表面信號(hào)受體的相關(guān)抗體，然后用抗體模擬受體的原配體細(xì)胞表面受體結(jié)合，從而啟動(dòng)細(xì)胞信號(hào)通路，這樣的抗體我們稱之為配體模擬激活性抗體。這其中最經(jīng)典的例子莫過于一些在腫瘤靶向治療中使用的抗體藥物，目前，臨床上至少有11種單克隆抗體藥物被認(rèn)定為是以受體激活方式發(fā)揮功能的。
目前除了常規(guī)的兔、鼠多抗和鼠單抗雜交瘤細(xì)胞制備篩選方案，基于噬菌體展示技術(shù)，本公司目前還能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)新的受體激活抗體的發(fā)現(xiàn)，我們有常備的天然抗體庫，也可以根據(jù)特定抗原的信息，依托先進(jìn)的原核或真核蛋白表達(dá)技術(shù)，制備免疫后噬菌體庫，然后針對(duì)受體重組胞外區(qū)（ECD）進(jìn)行特異性抗體篩選。經(jīng)過噬菌體ELISA初篩的到的單鏈抗體，還可以進(jìn)一步進(jìn)行一些基于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的功能性篩選。公司目前已分離得到包括TNF受體超家族、CD28、CD40、PD1、CD137等在內(nèi)的配體模擬型激活性抗體。
服務(wù)組合
服務(wù)項(xiàng)目 (Service Items) | 周期（周） Time(weeks) | 免疫庫 immunized library | 天然庫 naive library | 雜交瘤制備篩選 Hybridoma Screening |
多肽設(shè)計(jì)與合成 Peptide design & synthesis | 多肽設(shè)計(jì) Peptide design | ~2 | 可選，免費(fèi) |
多肽合成 Peptide synthesis | √ |
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小分子或多肽偶聯(lián) conjugation | √ |
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蛋白制備 Proteins preparation | cDNA合成 cDNA synthesis | 6~8 |
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| 另議，時(shí)間與價(jià)格均不包含在以下信息中 |
載體構(gòu)建 Vector construction |
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蛋白表達(dá)與純化 Protein expression & purification |
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免疫階段 Immunization | 免疫動(dòng)物 Immunized animals | ~8 | √ |
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ELISA檢測(cè) Elisa detection | √ |
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細(xì)胞融合與篩選 Fusion & Screening | 1.5 |
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亞克隆階段 Subcloning | 1 |
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腹水生產(chǎn)（2只大鼠） Ascites production (Injection on 2 mice) | 1 |
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cDNA制備 cDNA preparation | 逆轉(zhuǎn)錄制備cDNA文庫 prepare cDNA library by RT-PCR | ~1 | √ |
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cDNA 文庫質(zhì)檢 cDNA library QC check | √ |
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構(gòu)建Fab抗體庫 Fab library construction | VH與VL基因獲得 obtained VH and VL genes | 10~15 | √ |
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構(gòu)建初級(jí)抗體庫 primary antibody library construction | √ |
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構(gòu)建Fab抗體庫 Fab library construction | √ |
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噬菌體篩選 phage screening | 噬菌體顆粒包裝 phage particles package | 10~15 | √ | √ |
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磁珠親和篩選 magnetic beads affinity screening | √ | √ |
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陽性克隆回收基因測(cè)序 Recover positive clones and DNA sequencing | √ | √ |
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抗體表達(dá) Antibody expression | 特異性雙鏈基因合成與Fc基因橋接 synthetic of target phage gene and Fc gene | ~5 | √ | √ |
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構(gòu)建真核表達(dá)載體 Eukaryotic system expression plasmids construction | √ | √ |
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真核表達(dá) Eukaryotic system expression | √ | √ |
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穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系構(gòu)建 Stably transfected cell line construction |
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純化與檢測(cè) Purification and detection | 標(biāo)簽純化 Tag affinity purification | ~1 | √ | √ |
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親和純化 Affinity purification |
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特異性親和純化 Antigen specific affinity purification | √ | √ |
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總周期（月） Total lead time(months) | 7~9 |
注：
價(jià)格面議；
請(qǐng)慎重考慮周期事宜，以上時(shí)間僅為理想條件下最短周期；
